Definindo o interactoma de MYB-NFIB

Sobre o projeto de pesquisa

O carcinoma adenoide cístico (CAC) é um câncer relativamente raro, mas agressivo, que ocorre principalmente em glândulas salivares. A superexpressão do fator de transcrição oncogênico MYB, que ocorre como resultado de translocações MYB-NFIB ou amplificação MYB, é considerada o principal motor do CAC. Os efeitos da translocação MYB-NFIB em células normais de glândula salivar e glândula mamária são pouco conhecidos, principalmente no que diz respeito a sua ação em nível proteômico. Diferentes métodos de pesquisa podem determinar quais proteínas estão interagindo com uma proteína de interesse. A marcação de proximidade catalisada por enzimas (BioID) surgiu como uma nova abordagem para estudar as características espaciais e de interação de proteínas em células vivas. O objetivo deste estudo é definir o interactoma da proteína de fusão MYB-NFIB, identificando suas interações com outras proteínas em células de glândulas salivares. Células primárias serão obtidas de fragmentos teciduais de glândulas salivares. As células serão transfectadas com os seguintes vetores: Flag-TurboID-MYB-NFIB, Flag-TurboID-MYB e Vetor vazio TurboID. As células serão tratadas com biotina, e em seguida as proteínas biotiniladas serão enriquecidas e analisadas por espectrometria de massa. O interactoma será avaliado através de análise de bioinformática.